293T 细胞和 HEK 293 细胞：生物技术的重要工具

293T 细胞和 HEK 293 细胞是人类胚胎肾脏细胞系老年健身操66节，在生物技术和制药行业中广泛应用。它们的易于培养、高转染效率以及生产重组蛋白质的能力使其成为研究和应用的重要工具。

293T 细胞传代步骤

准备材料

传代需要以下材料：无菌培养板、无菌细胞刮刀、培养基、胰蛋白酶、抗菌剂和移液器。

传代步骤

传代过程通常包括以下步骤：

1. 去除培养基：小心吸出培养板中的培养基。
2. 洗涤细胞：用无菌 PBS 溶液洗涤细胞 1-2 次，以去除残留的培养基。
3. 胰蛋白酶消化：加入胰蛋白酶-EDTA 溶液，消化细胞 2-5 分钟，直到细胞从培养板表面脱离。
4. 终止消化：用培养基终止胰蛋白酶消化，将细胞悬浮并转移到离心管中。
5. 离心：以 300 x g 离心 5 分钟，将细胞沉淀。
6. 重悬细胞：小心吸出上清液，用新鲜培养基重悬细胞。
7. 计数细胞：使用血细胞计数器计数细胞，以确定细胞浓度。
8. 接种细胞：根据细胞浓度和所需的细胞数量，将细胞接种到新的培养板中。

传代频率取决于细胞生长速度和所需细胞数量。通常老年健身操66节，293T 细胞在 2-3 天后达到汇合，需要传代。

HEK 293 细胞传代

准备材料

HEK 293 细胞传代所需材料与 293T 细胞传代类似，包括无菌培养板、无菌细胞刮刀、培养基、胰蛋白酶、抗菌剂和移液器。

传代步骤

HEK 293 细胞传代过程也与 293T 细胞类似，包括以下步骤：

1. 去除培养基：小心吸出培养板中的培养基。
2. 洗涤细胞：用无菌 PBS 溶液洗涤细胞 1-2 次，以去除残留的培养基。
3. 胰蛋白酶消化：加入胰蛋白酶-EDTA 溶液，消化细胞 2-5 分钟，直到细胞从培养板表面脱离。
4. 终止消化：用培养基终止胰蛋白酶消化，将细胞悬浮并转移到离心管中。
5. 离心：以 300 x g 离心 5 分钟，将细胞沉淀。
6. 重悬细胞：小心吸出上清液，用新鲜培养基重悬细胞。
7. 计数细胞：使用血细胞计数器计数细胞，以确定细胞浓度。
8. 接种细胞：根据细胞浓度和所需的细胞数量，将细胞接种到新的培养板中。

HEK 293 细胞的传代频率也取决于细胞生长速度和所需细胞数量。通常，HEK 293 细胞在 3-4 天后达到汇合，需要传代。

注意事项

在传代 293T 细胞和 HEK 293 细胞时，有以意事项：

• 保持无菌条件至关重要，以防止细胞污染。
• 胰蛋白酶处理时间应根据细胞贴壁情况和细胞类型进行优化，以避免过度消化或消化不足。
• 传代太频繁会对细胞造成压力，导致生长速度下降甚至细胞死亡。
• 在传代过程中使用高品质培养基和抗菌剂，以促进细胞生长和防止污染。
• 传代前检查细胞健康状况，以避免传代受损或受污染的细胞。

293T 细胞和 HEK 293 细胞是生物技术和制药行业中的重要工具。通过遵循适当的传代步骤和注意事项老年健身操66节，研究人员可以确保细胞的健康和持续生长，以便在各种研究和应用中使用。